2021最新发现的⾃⾝免疫性脑炎-Gluk2脑炎

海藻酸盐型谷氨酸受体亚单位2(Gluk2)脑炎是2021年发现的新型自身免疫性脑炎，属于谷氨酸盐受体大家族（图1）。

图1:中枢神经系统疾病相关的谷氨酸盐类受体家族

在离子型谷氨酸盐受体中，有我们非常熟悉的NMDA和AMPA受体，第三类离子型谷氨酸盐受体就包括了海藻酸盐型谷氨酸受体（GLuK1-3)。与一般的离子型谷氨酸受体不同，Gluk2是神经递质释放的突触前调节器，同时存在于兴奋性和抑制性突触中。

抗Gluk2抗体致病机制可能与抗体介导的受体交联和内化有关，通过识别Gluk2细胞外区抗原表位，介导受体内化，可逆性降低突触和突触外Gluk2簇表达水平和Gluk2介导的电流;此外，抗Gluk2抗体还可与抗AMPAR和NMDAR抗体共存。

目前，发现和总结Gluk2脑炎的文章和数据还仅有一篇(2021，Annals Of Neurology，Q1），我们今天看看研究人员是如何发现和锁定这种最新的Gluk2脑炎。

图3:三种脑炎的脑组织免疫组化染色比较

A-C: Gluk2脑炎；J-L: AMPAR脑炎；M-O: NMDAR脑炎

图4:基于野生型和敲除Gluk2基因鼠脑的免疫沉淀

（I-R）使用5个不同患者的脑脊液（CSF）对野生型小鼠（I-M）和Gluk2敲除小鼠（N-R）的小脑进行免疫染色：I-N；J-O；K-P；L-Q（具有Gluk2和AMPAR抗体）、M-R（具有Gluk2和NMDAR抗体）分别对应同一患者。

图5:蛋⽩和细胞实验

（A）泳道2和3显⽰了⽤患者1（+）和对照⾎清（-）的⾎清沉淀的蛋⽩质的银染⾊。分⼦标记显⽰在泳道M中（箭头~96kDa）。泳道4和5显⽰了⽤商业Gluk2抗体进⾏的相应免疫印迹，证明⽤患者样品沉淀的顶部条带是Gluk2。

（B–D）基于细胞的测定，⽤患者⾎清抗体（绿⾊）免疫标记表达Gluk2的HEK293细胞，或针对Myc标签的商业抗体，以确认Gluk2的表达（红⾊）。D显⽰了共定位。

图（E-G）对应于使⽤来⾃健康受试者的⾎清的类似CBA，其显⽰与Gluk2（E）缺乏反应性。细胞核（蓝⾊）为40,6-⼆氨基-2-苯基吲哚（DAPI）。

（A、B）对应于表达Gluk2（Q）的HEK293细胞用对照血清或2名患者血清处理30分钟或5小时。电流响应通过在60mV下在细胞中超快速施用10mM谷氨酸来激活。

在A中，上部迹线显示用所示样品处理30分钟的细胞的电流响应，下部迹线显示使用相同样品处理5小时的电流响应（每个迹线表示连续施用4-7次谷氨酸的平均值）。

B中显示了未处理（基础）、与对照血清或2名患者血清孵育的细胞的谷氨酸诱发标准化峰值电流的平均值和SEM。

用对照血清处理30分钟或5小时的细胞的Gluk2介导的电流与未处理细胞的电流相似同样类似;与用2种不同患者的血清处理30分钟的细胞，与对照血清相比，用相同的2名患者血清处理5小时的细胞显示出Gluk2介导的电流显著降低。

总之，研究者在一些病因不明的脑炎或小脑炎患者中，确定了Gluk2是致病的靶点，这一点得到了以下几个发现的支持：

（1）抗体与大鼠海马神经元和表达Gluk2的HEK293细胞中的细胞外Gluk2表位反应；

（2）它们是IgG1并内化Gluk2受体，导致Gluk2的突触和突触外簇的显著但可逆的减少；

（3）它们还导致表达这些受体的HEK293细胞中Gluk2介导的电流显著减少，

（4）一些患者对经验性类固醇或一线免疫治疗有反应。

图7:与Gluk2有共存抗体的患者情况

1）临床症状：

虽然一些自身免疫性脑炎可表现为小脑症状，但几乎从未出现急性小脑炎。

这8例仅含Gluk2或主要抗体的患者中有4例出现早期和显著的小脑-脑干功能障碍或小脑炎（导致2例患者出现梗阻性脑积水）的临床或MRI表现；与仅使用Gluk2或主要抗体的患者组相比，6名GluK-Abs患者并发抗-AMPAR脑炎（有或无CRMP5抗体）或抗-NMDAR脑炎，另外随机选择的138名抗-NMDAR或AMPAR脑炎患者中无一人出现急性小脑炎、梗阻性脑积水，或眼阵挛-肌阵挛。

2）预后：

典型抗AMPAR或NMDAR受体脑炎的患者（共6名）同时存在Gluk2抗体，有4名患者为AMPAR抗体。与仅带Gluk2抗体的病例（共8名）相比，并发抗AMPAR或抗NMDAR脑炎的患者更可能有活动性肿瘤（主要是胸腺瘤）。带Gluk2抗体患者（共14名）中，有5名改善，其中3名显著改善，1名完全康复，这表明迅速诊断和类似于其他自身免疫性脑炎的免疫治疗方法可能有效。

如果出现不明原因脑炎的快速表现，临床放射性小脑受累，从轻度小脑症状到严重小脑炎，应怀疑为Gluk2抗体相关脑炎，可能伴有广泛的MRI T2-FLAIR异常，不限于小脑。伴随的发现可能包括脑病（记忆缺陷、行为改变和癫痫）、皮质脊髓束受累迹象（反射亢进、脚趾上移和共济失调痉挛步态），或视阵挛肌阵挛。

在症状出现时，应监测患者是否存在潜在的危及生命的后颅窝水肿和阻塞性脑积水。如果可能，应使用CBA和TBA 检查脑脊液和血清中的抗体。相关的综合征的患者中，AMPA或NMDAR抗体与Gluk2抗体可能同时存在。

参考文献：

1. ScottonWJ,KarimA,JacobS.GlutamateReceptorAntibodiesinAutoimmuneCentralNervousSystemDisease:BasicMechanisms,ClinicalFeatures,andAntibodyDetection.MethodsMolBiol.2019;1941:225-255.

2. LandaJ,GuaspM,MíguezCabelloF,GuimarãesJ,MishimaT,OdaF,ZippF,KrajinovicV,FuhrP,HonnoratJ,TitulaerM,SimabukuroM,PlanagumàJ,MartínezHernándezE,ArmanguéT,SaizA,GasullX,SotoD,GrausF,SabaterL,DalmauJ;Gluk2encephalitisstudygroup.EncephalitiswithAutoantibodiesagainsttheGlutamateKainateReceptorsGluk2.AnnNeurol.2021Jul;90(1):101-117.